صورة الدم الكاملة

1- تقدير نسبه الهيموجلوبين في الدم

أ‌- طريقة جهاز ساهلي :

تعتمد هذه الطريقة علي مقارنة الألوان وفيها يتحول الهيموجلوبين بواسطة حمض الهيدروكلوريك إلى هيماتين حمضي ويتكون هذا الجهاز من ثلاثة أنابيب – اثنتان ملونتان والثالثة( التي توجد بالمنتصف ) تستعمل لأجراء الاختبار وهذه مدرجه لكي تعطي قراؤة الهيموجلوبين بطريقتين :
اما بالنسبة المئوية (%) أو بالجرام ( جم)
كيفية العمل :
1. يؤخذ دم من الإصبع بواسطة ماصة الهيموجلوبين حتى العلامة (0.02 ملل] ).
2. تمسح الماصة من الخارج حتى لا يعلق بها أي دم زائد.
3. توضع هذه الكمية من الدم في أنبوبة جهاز ساهلي موضوع بها حمض هيدروكلوريك مخفف (1/10 ع يد كل) حتى العلامة 20%.
4. ترج الأنبوبـة جيدا وتترك لمدة 10 دقائق حتى يتحول الهيموجلوبين إلى أحد مشتقاته الملونة.
5. لاحظ اللون بعد ذلك: لو كان الناتج اغمق من لون الأنابيب الأخري ضع بواسطة ماصة باستير حمض يد كل المخفف بالتدريج نقطة نقطة حتى يصبح اللون مماثلا في الأنابيب الثلاثة.
6. اكتب قراءة الهيموجلوبين بواسطة التدريجيين الموجودين علي الأنبوبة ( جم%) وبالنسبة المئوية.
ملحوظة :
توجد في بعض الوحدات دفاتر تالكوست لتقدير الهيموجلوبين بالنسبة المئوية وهي غير دقيقة يمكن استخدامها عند اجراء مسح صحي خارج المعمل.


ب- تقدير الهيموجلوبين بطريقة الدرابكن : Drabkin Method

تقدر كمية الهيموجلوبين بقياس اللون الناتج عن اتحاده بالسيانيد بجهاز قياس الطيف الضوئي (Spectrophotometer )
ويجب ان يكون لون محلول التخفيف اصفر باهتا رائقا يعطي درجة امتصاص صفر عند قراءته علي جهاز القياس الطيفي عند طول موجي 540 نانوميتر باستعمال الماء المقطر (Blank)
تنتج الشركات كاشف لتقدير الهيموجلوبين بطريقة السيانيد يتم تخفيفه باتباع إرشادات الشركة المنتجة.
يحفظ محلول التخفيف في زجاجة بنية اللون لعدة شهور في درجة حرارة الغرفة.
كيفية العمل :
1. يوضع 5 مل محلول درا بكين + 20 ميكروليتر (20ul) دم باستخدام ماصة أوتوماتيكية ( أو ماصة الهيموجلوبين ) .
2. ترج الأنبوبة تم تترك لمدة 3 – 5 دقائق حتي يتم التفاعل .
3. يقرا علي طول موجي 540 نانوميتر بعد ضبط صفر الجهاز باستخدام محلول درابكين .
4. تقرأ عينة قياسية (Standard) علي الجهاز الحساب : درجة امتصاص الاختبار X تركيز المحلول القياسي X معامل التخفيف ---------------------- ------------------------------------------ درجة امتصاص القياسي 100 = تركيز الهيموجلوبين _ بالجرام / 100 مليلتر ) .
ملحوظة :
هناك بعض الكواشف يمكن قراءة نسبة الهيموجلوبين من جدول مرفق بالكاشف أو بعملية حسابية بسيطة وذلك في حالة عدم وجود المحلول القياسي.


طريقة أعداد منحني قياسي وجدول قياسي :

تعمل تخفيفات متتالية من المحلول القياسي Standard المعروف درجة تركيزه كآلاتي : 2:1 و 3:1 و 4:1 و 5:1وتقرا هذه التخفيفات بعد ضبط صفر الجهاز بمحلول درابكين.
يرسم منحني بياني تقدير الهيموجلوبين بالجرام / لتر في كل قراءة ومنه يمكن عمل جدول قياسي لكافة القراءات وينصح بقياس المحلول القياسي عند تغيير الكاشف أو اجراء صيانة للجهاز.


النسب الطبيعيه

 النسبة بالجرام
الرجال
13 –18 جم %
السيدات
11.5 – 16.5 جم %
أطفال (حديث الولادة)
16.5 – 19.5 جم %
أطفال (ثلاثة شهور)
9.5 – 13.5 جم %
أطفال السنة الأولى
1.05 – 13.5 جم %
أطفال السنة الأولى
1.05 – 13.5 جم %
أطفال 3 – 6 سنوات
12 –14 جم %
أطفال 10 – 12 سنة
11.5 - 14.5 جم %
سيدات حوامل
لا يقل عن 11 جم %

2- العد الكلي لكرات الدم الحمراء R.B.Cs Counting

العد بواسطة المجهر وشريحة العد Haemocytometer كيفية العمل :
1. يخفف الدم 200:1 في محلول التخفيف وذلك بإضافة 20 ميكروليتير دم إلى 4 مل محلول في أنبوبة وازمـــان ( يمكن اخذ العينة بواسطة الماصـــة ذات الانتفاخ والمقسمة 0.5 – 1 – 101 وذلك بسحب الدم حتى 0.5 ثم التكملة حتى 101 بمحلول التخفيف).

2. ترج الأنبوبة جيدا لمدة دقيقتين علي الأقل ( أو الماصة ).
3 . تملا شريحة العد بماصة شعرية أو ماصة باستير بعد وضع غطاء الشريحة.
4. تعد كريات الدم الحمراء بواسطة العدسة الشيئية X 10 أو X40 علي أن يدخل في العد الكريات التي تمس القاع والحدود الشمالية للمربعات الصغيرة في 5 مربعات من المربع الأوسط للشريحة ( المربعات الأربعة علي الأطراف + المربع الأوسط ).


طريقة العد :

خمس مربعات من المربع الأوسط في شريحة العد .
الحساب :
عدد كريات الدم الحمراء /مم3 = عدد الكريات * 10000


أسباب الزيادة في عدد كريات الدم الحمراء :

نقص الأكسجين – أمراض القلب وامراض تليف الرئتين ووجود بعض أنواع الهيموجلوبين غير الطبيعي.



أ- أخطاء تؤدي إلى زيادة العدد

1. حجم الدم اكثر من 20 ميكروليتر أو حجم المحلول اقل من الحجم المطلوب.
2. عدم مزج العينة جيدا مع محلول التخفيف.
3. توزيع كريات الدم الحمراء في شريحة العد غير متوازن.
4. مل خاطئ لشريحة العد.
5. عد جميع كريات الدم الحمراء الملامسة للخطوط الجانبية.


أسباب نقص كريات الدم الحمراء :

أمراض الدم مثل اللوكيميا وفشل النخاع العظمي .... الخ

ب- أخطاء تؤدي إلى نقص العدد:

1. حجم الدم اقل من 20 ميكروليتر أو حجم المحلول اكثر من الحجم المطلوب.
2. إرجاء العد لمدة طويلة.
3. وجود جلطة صغيرة في العينة.
4. وجود فراغات هوائية أو شوائب.
5. استعمال شريحة غير نظيفة.


النسب الطبيعيه:


الفئة النسبة – ملليمتر المكعب
الرجال
4.5 –6.5 مليون / ملليمتر المكعب
النساء
3.8 – 5.8مليون / ملليمتر المكعب
أطفال (3 شهور)
3.2 – 4.8 مليون / ملليمتر المكعب
أطفال( 3 – 6 أعوام)
4.1 – 5.5 مليون / ملليمتر المكعب
أطفال (10 – 12 عام)
4 – 5.4 مليون / ملليمتر المكعب

3- العد الكلي لكريات الدم البيضاء : Total Leucocytic Counting

بواسطة المجهر وشريحة العد Haemocytometer
محلول التخفيف يحلل كريات الدم الحمراء ويصبغ انويه كريات الدم البيضاء بلون بنفسجي فيسهل عدها.
كيفية العمل :
1- يخفف الدم 2:1 باستخدام الماصة ذات الانتفاخ المدرجة 0.5 ، 1 ، 11 بملئها بالدم حتى علامة 0.5 ثم بالمحلول حتى علامة 11.
2- يمكن عمل نفس التخفيف 20 ميكروليتر إلى 0.38 مل من المحلول ( باستعمال الماصة الأوتوماتيكية ) في أنبوبة زجاجية.

3- ترج الأنبوبة جيدا.
4- تملا شريحة العد بواسطة ماصة باستير بعد وضع غطاء زجاجي للشريحة.
5- تعد كريات الدم البيضاء في المربعات الأربعة الخارجــــية باستخدام العدسة الشيئية ( *10) للمجهر.
الحساب :
عدد كريات الدم البيضاء /مم3 :
عدد الكريات * 100/2 = عدد الكريات * 50

الأخطاء التي تؤدي إلى زيادة أو نقص عدد كريات الدم البيضاء :

نفس الأسباب التي تم ذكرها عند عد كريات الدم الحمراء . لتلافي هذه الأخطاء يمكن عد عينه أخري أو عدد أكبر من الكريات البيضاء.

أسباب الزيادة في عدد كريات الدم البيضاء:

1. زيادة فسيولوجية أثناء الحمل والولادة ، عقب مجهود عضلي وفي الأطفــال حديثي الولادة (18000 – 25000/مم3).
2. زيادة مرضية – العدوي بالميكروبات العنقودية والسبحية مثل التهاب اللوزتين والزائدة الدودية والتهاب حوض الكلي – الدرن.

أمراض الحساسية والجلدية والطفيليات.

العدوي بالفيروسات.

الأورام الخبيثة وسرطان الدم.

أسباب النقص في عدد كريات الدم البيضاء:

العدوي ببعض الفيروسات.

فشل النخاع العظمي.

التيفود والباراتيفود.

النسبه الطبيعية:


الفئة النسبة / مم 3 البالغين
4000 – 11.000 / مم3
أطفال( عام )
6000 – 18.000 / مم3
أطفال (4 – 7 أعوام)
5000 – 15.000 / مم3
أطفال (8 – 12 عام)
4.500 – 13.500 / مم3