إنزيمات a-Amylases بصفة عامة ثابتة عند درجة pH  من 5.5 إلى 8 وفي وجود الكالسيوم تكون ثابتة عند درجات الـ pH العالية أو المنخفضة. وتبدي إنزيمات الـ a-Amylases نشاطاً أمثل عند درجة pH  تتراوح من 4.8 إلى 6.5 ولكن هناك اختلاف في شكل الإنزيم وفي درجة الـ pH  المثلى حسب مصدر الإنزيم كما يتضح من جدول (1) وجدول (2). ومعظم إنزيمات الـ a-Amylases التي تم تنقيتها تفقد نشاطها عند درجة حرارة 50°م ولكن يمكن استعادة نشاط الإنزيم مرة أخرى في وجود الكالسيوم. وإنزيمات a-Amylases ليس لها مرافقات إنزيم ولكنها إنزيماتMetallo  بالنسبة للكالسيوم حيث يجب أن يتوفر على الأقل ذرة كالسيوم لكل جزيء من الإنزيم. وقوة ارتباط الكالسيوم بالإنزيم تعتمد على مصدر الإنزيم. ولا يدخل الكالسيوم فقط في تركيب هذه الإنزيمات ولكن وجود الكالسيوم ضروري لإنزيمات الـ a-Amylases حتى تكون نشطة. ففي وجود الكالسيوم تكون هذه الإنزيمات مقاومة للظروف المعاكسة مثل درجات الـ pH  والحرارة غير العادية، كما أنها تكون مقاومة للمعاملة باليوريا أو التعرض للإنزيمات المحللة للبروتين مثل الببسين والتربسين والـ Subtilisin والـ Papain.

جدول (1) خصائص بعض إنزيمات الـ a-Amylases البكتيرية

 

الميكروب

درجة الـ pH المثلى

درجة الحرارة المثلى (°م)

الوزن الجزئي (ك.د)

Bacillus acidocaldarius

3.5

75

68

B. amyloliquefaciens

5.9

65

49

B. caldolyticus

5.4

70

ـ

B. coagulans

7.5-8.5

85

ـ

B. licheniformis

5-8

76

22.5

B. stearothemophilus

5.4-6.1

70

53

B. sp NRRL B 3881

9.2

50

ـ

B. sp

5-6

70

ـ

B. subitilus

5.3-6.4

50

47

B. subitilus NRRL B 3411

6-7

70

50

Bacteroides amylophilus

6.3

43

92

Micrococcus halobius

6-7

50-55

89

Streptomyces praecox

6-7

40

ـ

S. hygroscopicus

5-6

50-55

48

S. aureofaciens

4.6-5.3

40

40

Thermomonospora viridis

6.5

55

ـ

T. curvata

5.5-6

65

62

Thermoactinomyces vulgaris

5

70

ـ

                               

ولكن إنزيمات الـ a-Amylases التي لا يوجد معها كالسيوم تكون عرضة للدنترة بواسطة الحامض والحرارة واليوريا بسهولة شديدة كما تكون عرضة للتحلل بواسطة الإنزيمات المحللة للبروتين أيضاً بسهولة شديدة. وقد وجد أن إنزيمات الـ a-Amylases التي ينتجها الميكروب Bacillus subtilis  تتطلب على الأقل 4 جرام من ذرات الكالسيوم لكل 1 مول من الإنزيم حتى يكون في كامل نشاطه. 

وإنزيم الـ a-Amylase المنتج من الفطر Aspergillus niger سواء أكان مقاوم للحامض أو غير مقاوم للحامض يحتوي على 1 جرام من الكالسيوم الذي يمكن أن يزال بالمادة المخلبية Ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA). وقد وجد أنه يمكن استعادة جزء من نشاط هذه الإنزيمات بإعادة إضافة الكالسيوم. كما أن كل جزيء من إنزيم الـ a-Amylases الذي يفرزه فطر  A. oryzae يرتبط بـ 10 جرام من الكالسيوم منهم 9 جرام ارتباطهم ضعيف جداً ويمكن إزالتهم بسهولة ولكن لا يتأثر نشاط الإنزيم بذلك. ومن المحتمل أن تكون ذرات الكالسيوم هذه ذات الارتباط الضعيف هي التي تجعل الإنزيم مقاوم للدنترة. كما وجد أن ذرة الكالسيوم المرتبطة بشدة يمكن استبدالها بأي معدن آخر ثنائي التكافؤ مثل الباريوم أو الماغنسيوم بدون أن يتأثر نشاط الإنزيم. ولكن المعادن الثقيلة مثل النحاس والزئبق والفضة والرصاص تثبط إنزيم الـ a-Amylase.     

 

جدول (2) خصائص بعض إنزيمات الـ a-Amylases الفطرية

<td style="border-bottom: windowtext 1pt solid; border-left: windowt

الميكروب

درجة الـ pH المثلى

درجة الحرارة المثلى (°م)

الوزن الجزئي (ك.د)

Aspergillus niger

5 و 6

60

ـ

A. oryzae

5.5-5.9

40

52.6

Mucor pusillus

3.5-4

65-70

48

Paecilomyces subglobosum

4

38

ـ

Lipomyces kononenkoae

5.5

40

38

Lipomyces starkeyi

3-4

50-60

ـ

Schwanniomyces castellii

6

60

40

Torulopsis ingeniosa

5.5

50

ـ

المصدر: جابر زايد بريشة: الإنزيمات الميكروبية وتطبيقاتها في الصناعة والطب
gaberbresha

Prof. Gaber Breisha

ساحة النقاش

AkrumHamdy

الأخ الحبيب الدكتور / جابر
مقال رائع كالعادة و اسمح لى بتلك الأضافة:
انزيم الأميليز:
الأميليز عادة موجودة في الدم والبول بكميات صغيرة. الأميليز هي واحدة من عدة الانزيمات التي ينتجها البنكرياس للمساعدة على هضم الدهون والبروتينات والكربوهيدرات ويفرز من خلال قناة البنكرياس في الاثني عشر ، حيث أنه يساعد على كسر الكربوهيدرات الغذائية. وينتج أيضا الأميليز الأجهزة الأخرى ، ولا سيما الغدد اللعابية.

عندما يصاب خلايا البنكرياس (كما في التهاب البنكرياس) ، أو يتم حظر قناة البنكرياس (من حصوة أو نادرا ما ورم البنكرياس) ، وزيادة كميات الأميليز تجد طريقها إلى مجرى الدم ، وزيادة تركيزات في الدم والبول ، و الذي هو الطريق لإفراز الأميليز من الدم.

كيفية عمل فحص أنزيم amylase
1) نقوم بأخذ عينة دم من المريض في انبوبة
2) ومن ثم نقوم بوضعها في centrifuge لمدة 4 دقائق .
3) بعد ذلك نقوم باخذ العينة والتي تكون مفصولة على هيئة طبقتين ، الأولى serum والثانية clotting blood .
4) ناخذ كمية من serum وذلك بواسطة micro pipit بمقدار 1ml ومن ثم نضعها في clean test tube.
5) نضيف على الكمية السابق ذكرها كمية من reagent من فحص amylase بمقدار 10ml .
6) ثم نضيف على الكميتين السابقتين كمية مقدارها 100ml من serum المريض المراد فحصه .
7) ثم نأخذ العينة مباشرة ونضعها على جهاز bio system ، وذلك لقياس كمية الأنزيم الموجودة في الدم .

gaberbresha

أنا عارف إن الكلام العلمي دمه تقيل وكما أقول دائماً نحن نحتاج إلى من يستطيعون تبسيط العلوم، وهم قلة قليلة في مصر، ولن تنهض مصر إلا إذا استطاع علمائها تبسيط العلوم لعامة الناس، وعن نفسي أنا أرضيت ضميري وبذلت في هذا الأمر مجهود كبير، ولو دققتي النظر ستجدين أن أكثر من 90% من مقالاتي مفهومة جداً لعامة الناس، حتى أن الكثيرين ينسون أنها مقالات علمية، فالحمد لله رب العالمين

Gaber Breisha فى 4 سبتمبر 2011
gaberbresha

آسف مرة أخرى

Gaber Breisha فى 3 سبتمبر 2011

Prof. Gaber Breisha

gaberbresha
بسم الله الرحمن الرحيم: أعدكم جميعاً أن أعمل جاهداً ليكون هذا الموقع مفيداً لكل من يريد أن يستمتع بالمعرفة، وأتمنى أن يشعرني هذا العمل أنني أديت دوري في الحياه، وأنني جدير أن أكون ضمن الذين كلفهم الله بعمارة الأرض وأقرر أنني لا أبتغي من وراء ذلك شيئ سوى أن يكون »

ابحث

تسجيل الدخول

عدد زيارات الموقع

457,033