مقدمة:
تعتبر أمراض أعفان الثمارPod rots من أهم الأمراض المسببة لفـقـد كمي ونوعي للمحصول في مصر هذا إلى جانب تلوث الثمار بالأفلاتوكسين (Aflatoxin contaminations) حيث يمثلان معاً أحد أكبر المعوقات التي تواجه منتجي ومصدري الفول السوداني في مصر. وتسبب أعفان الثمار العديد من الفطريات وتختلف تبعاً لمظهر الأعراض من عفن بني (R. (solani عفن وردي (F. moniliforme) تدهور تام (ويسببه العديد من الفطريات أهمها M. phaseolina, Pythumi myriotylum, S. rolfsii ) هذا إلي جانب العفن الأصفر Aspergillus flavus, A. parasiticus (وتعد الأفلاتوكسين من أهم السموم الفطرية لما لها من أثار ضارة على صحة الإنسان والحيوان حيث يؤدي تراكمها داخل الجسم إلى تليف الكبد وتلفه إلي جانب كونها من المواد المسرطنة كما أن لها تأثير ميتاجيني وتيراتوجينى على الأجنة وتنتقل عبر لبن الأم وفي حليب الأبقار. وقد تعرف العالم علي الأفلاتوكسين في أوائل الستينات بعد حادثة نفوق 100000 من فراخ الرومي في إنجلترا بعد التغذية على أعلاف فول سوداني ملوثة بالأفلاتوكسين. وأستهدف هذا البحث إلى إنتاج طفرات فول سوداني تتميز بانتاجية العالية والمقاومة لأمراض أعفان الثمار والتلوث بالأفلاتوكسين، وكانت نتائج البحث كما يلي: تم تقيييم عشرة طفرات فول سوداني هم RT-6, RT-7, RT-8, RT-9, RT-10, RT-11, RT-12, RT-13, RT-14 and RT-15 بالإضافة إلى الصنف الأب (جيزة 5) لمقاومتهم للمسببات المرضية المسببة لاعفان الثمار ، ولإصابتهم بالفطريات المفرزة للافلاتوكسين بالإضافة للتلوث بالافلاتوكسين، تحت ظروف الصوبة والحقل ، في النوبارية ، فى الموسميين الصيفيين 2004، 2005 . أظهرت طفرات الفول السوداني المختبرة انخفاضا واضحا في نسب الإصابة بأمراض أعفان الثمار وتواجد الفطريات المفرزة للافلاتوكسين Aspergillus flavus and A. Parasiticus و التلوث بالافلاتوكسينات تحت ظروف الصوبة والحقل مقارنة بالصنف الأب (جيزة 5). كانت الطفرات RT-10, RT-12 and RT-7 هي الأكثر مقاومة لأمراض أعفان الثمار و الأقل تلوثا أو الخالية تماما من التلوث بالافلاتوكسينات B1 and B2 تحت ظروف العدوى الصناعية بالفطريات المفرزة منفردة أو مجتمعة أو تحت ظروف العدوى الطبيعية بالحقل. تحت ظروف الحقل ، تزايد محصول الثمار للمتر المربع معنويا في الطفرات العشر من الفول السوداني الناتجة من التشعيع بأشعة جاما مقارنة بالصنف الأب (جيزة 5). باستثناء الطفرة RT-15 والتي لم تختلف معنويا معه. زاد وزن إل 100 ثمرة معنويا في الطفرات RT-9 بينما تناقصت معنويا في الطفرات RT-14 and RT-15 مقارنة بالصنف الأب (جيزة 5). زادت نسبة الثمار ذات القطر الأكبر من 14 مم زيادة معنوية في الطفرتين RT-8 and RT-11 في حين لم تتغير معنويا نسبة البذور الكلية الناضجة عن الصنف الأب (جيزة 5). وعلى العكس، زادت نسبة البذور الكبيرة (أكبر من 8 مم) معنويا في الطفرات RT-11, RT-13 and RT-14. نقصت نسبة الزيت معنويا في الطفرات العشر من الفول السوداني مقارنة بالصنف الأب (جيزة 5). استخدمت طريقتين للتضاعف العشوائي للحمض النووي هما RAPD و ISSR لإيجاد واسمات وراثية جزيئية علي مستوي الحمض النووي DNA لتمييز المقاومة أو القابلية للإصابة لأمراض أعفان الثمار و التلوث بالافلاتوكسين حيث تم استخدام ثلاثة عشر بادئا عشوائيا للـ RAPD ، نجحت عشرة منها في إجراء تضاعف لقطع من الحمض النووي DNA، وأعطت اثنتان منها شظايا أحادية المظهر بينما نجحت الثمانية بادئات الأخرى في مضاعفة أجزاء متعددة المظهر. وقد أمكن إجراء تعريف وراثي للأصناف المختبرة عن طريق التباينات المظهرية الناتجة من التضاعف العشوائي لأجزاء من الحمض النووي DNA لكل تركيب وراثي ، كما أظهرت بعض البادئات (OP-A9, OP-B10, OP-C7, OP-V6) وجود بعض الشظايا من الحمض النووي DNA والتي ارتبطت إما إيجابا أو سلبا مع صفة المقاومة أو الإصابة بالمرض.وبالنسبة لبادئات ISSR ، فقد تم استخدام أثنى عشر بادئا، نجحت ثمانية منها في إجراء تضاعف لقطع من الحمض النووي DNA، وأعطت أربع منها شظايا أحادية المظهر بينما نجحت الأربع بادئات الأخرى في مضاعفة أجزاء متعددة المظهر. وقد أمكن إجراء تعريف وراثي للطفرات المختبرة عن طريق التباينات المظهرية الناتجة من التضاعف العشوائي لأجزاء من الحمض النووي DNA لكل صنف تحت الاختبار باستخدام البادئات (I-18, 814.4, 844-B and UBC-830)، ولم يكتشف وجود أى شظايا من الحمض النووي DNA والتي ارتبطت إما إيجابا أو سلبا مع صفة المقاومة أو الإصابة بالمرض. وقد تم حساب التباعد الوراثي بين الطفرات والصنف الأب والطفرات وبعضها وتم رسم الشجرة التطورية (tree consensus)، والتى أظهرت ان الطفرات المقاومة لأمراض أعفان الثمار والخالية من التلوث بالافلاتوكسين تقع في نفس المجموعة دائما مع تحليل كل من RAPD و ISSR منفردين ومجتمعين.
تم إعداد البحث ونشره بواسطة كلا من:
د/ كلارا رضا عزام د/ ممدوح محمد عبد الفتاح خليفة
د/ صبحي عازر د/ محمد فتحي أبو العلا
للحصول على نسخة كاملة من البحث
يمكن مراسلة د/ ممدوح محمد عبد الفتاح خليفة
معهد بحوث أمراض النباتات
علي عنوان البريد الألكتروني
ساحة النقاش